Règlements et programmes d'études

Laboratoires médicaux
L'organisation des laboratoires dans tous les pays est généralement un système à trois ou quatre niveaux avec divers liens fonctionnels possibles entre eux. Une manière possible de mise en réseau des laboratoires est montrée dans la figure.
Figure: Réseautage des laboratoires
 
 

Services de laboratoire périphérique

Les laboratoires périphériques sont situés au premier point de contact des patients avec les services de santé. Dans la plupart des pays en développement, ils ne sont disponibles qu'au niveau du centre de santé primaire ou du centre de santé communautaire (centre de santé primaire amélioré).
Les fonctions exercées par ces laboratoires:
Ces laboratoires fournissent un soutien technique aux services préventifs, curatifs et promotionnels pour l'individu ainsi que pour la communauté.
 

Personnel

Le personnel des laboratoires périphériques devrait comprendre un technicien et un assistant de laboratoire.
 

Équipement et fournitures

L'équipement et les fournitures nécessaires comprennent de bons microscopes, centrifugeuses, autoclaves, réfrigérateurs, balances, pH-mètres, incubateurs, bain-marie, milieux de transport, verrerie, écouvillons stériles et réactifs pour la coloration (par exemple Gram, Albert, Ziehl Neelsen, Romanowsky) pour l'examen chimique de l'urine, des kits et des réactifs pour les tests de diagnostic rapide, des seringues et des aiguilles stérilisées, des micropipettes et des embouts ainsi que des flacons de prélèvement stériles pour l'analyse du sang / sérum et de l'eau.


 

Tests à effectuer

Les laboratoires périphériques doivent effectuer des tests de santé publique ainsi que des tests cliniques. Parmi les tests d'intérêt pour la santé publique, les maladies d'importance épidémiologique plus importante devraient être prioritaires. L'analyse des échantillons d'environnement (en particulier l'eau) fait également partie des priorités en matière de santé publique. Certains tests sérologiques rapides peuvent être utiles dans l'étude des profils épidémiologiques de maladies importantes et peuvent également être effectués dans des laboratoires périphériques.
Les tests à effectuer par les laboratoires périphériques dépendent de la disponibilité des ressources, de la main-d'œuvre, de la technologie et de la prévalence de diverses maladies dans la zone couverte par le laboratoire. Une liste suggérée est fournie dans le tableau.
Tableau: Tests suggérés à effectuer dans les laboratoires périphériques
 
Procédure / Spécimen Pour la détection / le diagnostic de
Examen de l'urine Cellules de Pus, globules rouges
Albumine
Sucre
Examen des selles Ova et kystes
Frottis tachés
Spécimen de gorge
Expectorations
LCR (pyogène et tuberculeuse)
Frottis sanguin périphérique
Diphtérie
Tuberculose
Méningite
Paludisme, filariose
Tests diagnostiques rapides VIH
Surface de l'hépatite B Ag
Syphilis
Méningococcie



Services de laboratoire intermédiaires
Dans la plupart des pays en développement, les laboratoires intermédiaires sont situés dans les districts ou les sièges régionaux et peuvent agir en tant que laboratoires cliniques et de santé publique.

 Les fonctions exercées par ces laboratoires:
Support de laboratoire au diagnostic clinique / santé publique Assurance qualité Soutien logistique et technique, Formation du personnel pour les laboratoires périphériques
Supervision et suivi des laboratoires périphériques
Les laboratoires intermédiaires aident au diagnostic et au traitement de chaque patient et sont également utilisés comme laboratoires de santé publique pour la surveillance épidémiologique et le contrôle des maladies dans la communauté. Ces laboratoires servent également de lien entre les laboratoires périphériques et le laboratoire central / d'état pour:
 

Collecte, stockage et analyse des données.


Distribution de réactifs, médias, manuels de laboratoire.


Achat d'équipement


Supervision des laboratoires périphériques.


Mener un système externe d'évaluation de la qualité (EQAS) pour les laboratoires périphériques.


Participer à EQAS organisé par les laboratoires d'état / centraux.


Envoyer des échantillons à des laboratoires supérieurs / de référence pour la caractérisation de l'isolat / la confirmation du diagnostic.

           

Personnel

Pathologiste qualifié / microbiologiste
(Docteur en médecine / diplôme en pathologie clinique)
Techniciens
DMLT (diplôme en technologie de laboratoire médical) avec expérience
Assistants de laboratoire (DMLT)
Assistants de laboratoire
Nettoyeur
Commis-magasinier
Comme il peut ne pas être possible d'avoir un épidémiologiste à temps plein, au moins une aide à temps partiel d'un épidémiologiste devrait être disponible.
Inonder la zone de déversement totale, y compris le conteneur brisé avec un désinfectant.


Laissez tranquille pendant 10 minutes.


Vadrouille avec de la ouate ou du papier absorbant.


Porter des gants jetables, un tablier et des lunettes de protection.


Si une pelle à poussière et une brosse ou des pinces ont été utilisées, celles-ci nécessitent également une désinfection.


Pour le sang ou les virus, des hypochlorites (10 g / L) sont utilisés.


Ne pas utiliser de solution d'hypochorite dans les centrifugeuses.


Utilisez du glutéraldéhyde activé (20 g / L) sur les surfaces pour la décontamination virale.


Placer tous les matériaux potentiellement contaminés dans un récipient séparé et les conserver jusqu'à ce qu'ils soient contrôlés.


Restreindre l'accès à une telle zone jusqu'à ce que la surveillance de la contamination ait été effectuée.

          

Gestion des accidents de laboratoire

Une boîte de premiers secours bien équipée doit être conservée au laboratoire dans un endroit connu et accessible à tous les membres du personnel. La boîte doit être clairement marquée et, de préférence, être faite de métal ou de plastique pour éviter les dommages causés par les parasites. Un médecin doit être consulté sur le contenu de la boîte. Un tableau de premiers soins donnant le traitement immédiat des coupures, brûlures, empoisonnements, chocs et collapsus doit être préparé et affiché au laboratoire.
 

Instructions générales de laboratoire pour la sécurité

Les directions générales du laboratoire saillant qui doivent être respectées par tous sont:
 

Les cheveux longs doivent être soigneusement écartés des épaules.


Ne portez pas de bijoux lors des séances de laboratoire.


Gardez les doigts, les crayons, les boucles bactériologiques, etc. hors de votre bouche.


Ne pas fumer dans le laboratoire.


Ne pas lécher les étiquettes avec la langue (utiliser de l'eau du robinet).


Ne buvez pas de verrerie de laboratoire.


Ne vous promenez pas dans le laboratoire. activités incontrôlées provoquent:

-les accidents
-distract les autres
-protection

Ne placez pas de pipettes contaminées sur la paillasse.


Ne jetez pas les cultures contaminées, les verreries, les pipettes, les tubes ou les lames dans la corbeille à papier ou la poubelle.


Évitez la dispersion des matières infectieuses.


Faites fonctionner les centrifugeuses, l'homogénéisateur et les secoueurs en toute sécurité.


Immuniser les travailleurs de laboratoire contre les maladies évitables par la vaccination telles que l'hépatite B, la méningite à méningocoques, la rage, etc.

         

Assurance qualité:
L'assurance qualité (AQ) est un vaste concept couvrant toutes les questions qui influent individuellement ou collectivement sur la qualité d'un produit. Il désigne un système d'amélioration continue de la fiabilité, de l'efficacité et de l'utilisation des produits et services. Dans le contexte de l'assurance qualité, deux définitions importantes doivent être clairement comprises:
Contrôle de qualité interne (CIV): qui désigne un ensemble de procédures effectuées par le personnel de l'établissement de santé (travailleurs médicaux, paramédicaux et laborantins) pour évaluer de manière continue et simultanée les travaux de laboratoire afin que le laboratoire produise des résultats de qualité. soins au niveau des patients et de la communauté.
Évaluation externe de la qualité (EQA): est un système d'évaluation objective de la performance du laboratoire par un organisme externe. Cette évaluation est rétrospective et périodique mais vise à améliorer l'IQC.
L'IQC et l'EQA sont complémentaires pour garantir la fiabilité des procédures, des résultats et de la qualité du produit.
 

Quel est l'objectif de l'assurance qualité?

      

Les programmes d'AQ sont requis pour les raisons suivantes:

      

Améliorer la qualité des soins de santé


Générer des résultats fiables et reproductibles


Établir une comparabilité entre laboratoires dans les essais en laboratoire.


Établir la crédibilité du laboratoire auprès des médecins et du grand public.


Motiver le personnel pour d'autres améliorations.


Prévention des complications juridiques pouvant découler de résultats médiocres.

       

Facteurs affectant la qualité

Il est communément admis que la qualité des résultats de laboratoire dépend uniquement du laboratoire effectuant cette analyse. Cependant, il existe de nombreux facteurs pré-analytiques et post-analytiques qui influencent de manière très significative la qualité des résultats finaux. Le principe de "GIGO" - "Garbage in Gabage Out" s'applique très bien aux tests de laboratoire aussi. Certains des facteurs importants influençant la qualité sont énumérés ici:
Spécimen: C'est le facteur le plus important. La sélection du bon échantillon, la collecte correcte, la quantité adéquate, le transport approprié au laboratoire et le traitement de l'échantillon avant le test sont des facteurs cruciaux.
Personnel: La qualité des résultats de laboratoire générés est directement proportionnelle à la formation, l'engagement et la motivation du personnel technique.
Facteurs environnementaux: Un éclairage inadéquat, un espace de travail ou une ventilation ou des conditions de travail non sécuritaires peuvent influencer les résultats du laboratoire.
Facteurs analytiques: La qualité des réactifs, des produits chimiques, de la verrerie, des taches, des milieux de culture, l'utilisation de procédures standard et d'équipements fiables influencent tous les résultats de laboratoire. Défaut d'examiner un suffi.
Examen microscopique:
 
Préparations humides salées et iodées

Préparations salines humides:
Méthode: placer une petite goutte de solution saline à 0,85% sur une lame de verre, en mélangeant avec une très petite portion de selles à l'aide d'un applicateur en bois, puis placer une lamelle couvre-objet
Valeur: détecter les œufs et les larves d'helminthes et de trophozoïtes protozoaires mobiles.

Préparations humides à l'iode:
Méthode: Une goutte d'iode de Lugol mélangée à une petite portion de selles sur la lame et glissée
Valeur: détecter les kystes protozoaires
La conservation des échantillons est nécessaire lorsque les échantillons de selles ne peuvent pas être examinés dans l'intervalle de temps prescrit (voir ci-dessus). Divers conservateurs sont disponibles, les deux plus couramment utilisés étant le formol aqueux à 10% et le PVA (alcool polyvinylique).
Parce que 10% de formol et de PVA ont des avantages complémentaires, il est recommandé de diviser et de conserver l'échantillon dans les deux types de conservateurs (ajouter un volume de selles à trois volumes de conservateur.) Les échantillons conservés peuvent être conservés plusieurs mois.

Les échantillons conservés dans du formol peuvent être testés directement (montage humide, dosage immunologique, colorant chromotrope) ou peuvent être soumis à une procédure de concentration avant d'être testés.
Les procédures de concentration séparent les parasites des débris fécaux et augmentent les chances de détecter les organismes parasites lorsqu'ils sont en petit nombre. Ils sont divisés en techniques de flottation et techniques de sédimentation.
Les techniques de flottation (les plus fréquemment utilisées: le sulfate de zinc ou le sucre de Sheather) utilisent des solutions qui ont une densité plus élevée que les organismes à faire flotter, de sorte que les organismes atteignent le sommet et que les débris coulent vers le fond. Leur principal avantage consiste à produire pour l'examen un matériau plus propre que les techniques de sédimentation. Les inconvénients de la plupart des techniques de flottation sont que les parois des œufs et des kystes s'effondrent souvent, entravant l'identification; et que certains oeufs parasites ne flottent pas.
Les techniques de sédimentation utilisent des solutions de densité plus faible que les organismes parasites, concentrant ainsi ces dernières dans les sédiments. Les techniques de sédimentation sont recommandées pour les laboratoires de diagnostic général car elles sont plus faciles à réaliser et moins sujettes aux erreurs techniques.
Concentration de sédimentation formaldéhyde-acétate d'éthyle
Valeur: détecter les œufs et les larves helminthiques, les kystes protozoaires et, dans une moindre mesure, les trophozoïtes
Méthode:
-Dans le tube à centrifuger, émulsionner 1g de selles dans 15 ml de solution saline, filtrer à travers deux couches de gaze puis centrifuger (1 minute à 2000 tr / min)
-Ajouter à sédimenter 10 ml de formol à 10% pendant 10 mm puis 3 ml d'acétate d'éthyle
-Arrêter le tube, agiter vigoureusement en position inversée pendant une minute et centrifuger (1 minute à 2000 tr / min)
Quatre couches se sont formées: acétate d'éthyle, débris fécaux, formol et sédiments au fond
-Désactiver le bouchon de débris avec un applicateur, décanter tout sauf les sédiments
-mélange quelques gouttes de formel avec des sédiments et examine comme préparation humide
Les spécimens conservés dans du PVA sont principalement utilisés pour la coloration permanente au trichrome. Avant la coloration, ils sont traités comme suit:
Assurez-vous que l'échantillon est bien mélangé.
Préparer un frottis en utilisant 2 à 3 gouttes de l'échantillon en fonction de la densité.
Fixer la chaleur sur le chauffe-toboggan à 60 ° C pendant 5 minutes ou à l'air complètement à température ambiante.
Les lames peuvent être colorées au trichrome ou conservées pendant plusieurs mois dans un plateau ou une boîte à glissière pour la protection contre les taches futures.
 

 

Procédure de flottation de sulfate de zinc:
Valeur: pour les œufs, les larves et les kystes, mais inadaptés à Schistosoma mansoni et aux œufs operculés
Méthode:
-Dans le tube de centrifugation, émulsionner une partie des fèces dans une solution saline, filtrer à travers deux couches de gaze puis centrifuger
-Decante surnageant et le remplacer par une solution de sulfate de zinc de 33%, bien mélanger et centrifuger
-Utiliser une boucle de fil, examiner le fluide supérieur pour les œufs, les larves et les kystes
 

Procédure de flottation de sucre de Sheather:
Valeur: pour les oocystes de Cryptosporidium et les oocystes d'Isospora
Méthode:
-Dans le tube de centrifugation, émulsionner une partie des fèces dans la solution de sucre de Sheather, puis centrifuger (5-10mm à 350xg)
-en utilisant une boucle de fil, faire une préparation humide ordinaire (ne pas ajouter de solution saline ou d'iode)
-Examiner sous microscopie à contraste de phase. Les oocystes apparaissent comme des structures réfractiles.
-Tenue par des taches acido-résistantes

(3) Récupération des larves de nématodes des fèces ou du sol
Les larves de vers à crochet, Strongyloides et Trichosfrongylus sont récupérées par:

1-Tabouret Culture
Culture I-Charcoal:
-Dans une boîte de Pétri émulsionner un morceau de selles avec de l'eau et du charbon animal (empêcher la putréfaction)
- recouvert d'une autre boîte de Pétri contenant du papier filtre humide (fournir de l'humidité) et conservé dans un endroit de ver pendant 1 semaine
-Larvae, si présente va migrer vers le papier filtre humide

Culture de tube d'essai d'II:
-Thin film de fèces réparties sur le milieu de la bande de papier filtre et mettre dans un tube à centrifuger conique contenant de l'eau à son extrémité inférieure toucher le papier filtre
-Laissez dans un endroit chaud pendant 1 semaine. L'écoulement capillaire de l'eau vers le haut à travers le papier garde les fèces humides
-Les larves migrent dans l'eau pour être vues et examinées

La technique de 2-Baermann: dépend de l'hygrotropisme + ve
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